菌种的母种的培养基什么配制？
2018-05-23 19:06:01王***
菌种的母种的培养基什么配制？菌种的母种的培养基什么配制？：母种培养基配制1.常用配方母种培养基可采用普通PDA或PSA培养基。 一般杏鲍菇菌丝长满试管需10〜15天。为了加快菌丝生长速度，?
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(1) MGYA培养基蛋白胨1克，麦芽糖20克，酵母2克， 琼脂20克，水1000毫升。(2) PDYA培养基马铃薯300克，酵母粉20克，葡萄糖 20克，蛋白胨1克，琼脂20克，水1000毫升。(3) 麦芽浸汁培养基麦芽浸汁20克，蛋白胨5克，琼脂 15克，水1000毫升。
2。制作方法母种培养基种类很多，但制作方法和步骤基本 相同。(1) 称量和配制对易溶物质，按配方准确称取后置于烧杯或不锈钢锅等容器中（不可用铜、铁器皿，以免铜、铁锈混入培 养基中），加人其量1/4〜1/3的水，搅成糊状；对难溶物质，按 配方称取后加适量水，加热并不断搅拌促其溶解；对微量元素和 生长素，因需要量很少，难以称准，可称取适量先溶解调成高浓 度母液，再按比例换算后从中取出需要的量；对去皮挖芽眼切块 的马铃薯按配方称取后置容器中，加清水1000毫升，文火煮沸 20〜30分钟后，用4〜6层湿纱布过滤取汁，最后均要补足水量 至1000毫升。
在配制合成培养基过程中，为避免产生沉淀造成 营养损失。，加料顺序是：先加缓冲化合物，溶解后再加主要元 素，然后加微量元素，最后加维生素、生长素等。最好是每种营 养成分溶解后再加人第2种营养成分。如果各种成分均不会产生 沉淀，也可一起加入。 (2) 添加琼脂及分装将称好的琼脂剪成小块，加人上述配 好的液体培养基中，边加热边搅拌，以防其沉锅底烧焦或溢出， 烧糊的培养基营养物质遭破坏，且还易产生对菌丝生长有害的物 质，不宜再用。
加热过程中损失的水分应补足。待琼脂完全溶化 后，用6〜8层湿纱布（纱布经热水浸后拧干）迅速过滤，以提 高培养基的透明度，过滤后要趁热进行分装。分装前要准备好容器。制作母种常用试管有不同规格，常用 的有18毫米X180毫米、20毫米X200毫米或25毫米X200毫米等规格。
所用容器事先要清洗、干燥。新启用的试管因管内常残留烧碱，最好先用稀硫酸液在烧杯中煮沸，再冲洗干净，倒置晾干备用，切勿现洗现用，以免因管、瓶壁附有水膜，导致培养基易在试管内滑动，俗称“转管”。分装试管时，要尽量避免培养基黏附管口、管壁，如果不慎培养基黏着管口或管壁，一定要用纱布擦净，以免培养基粘住棉塞而影响接种，或增加杂菌污染率。
试管装量根据需要而定，如果制斜面培养基，装量一般为试管高度的1/5〜图3—3母种培养基分装 1/4;如果制深层培养基，一般为试管高度的1/2〜2/3。母种培养基分装如图3_3。(3) 塞棉塞棉塞可过滤空气，防止杂菌侵入，还可减缓培 养基的水分蒸发。
因此，在培养基分装好后均要及时加上棉塞。 棉塞用普通棉花制作，不宜使用脱脂棉，因脱脂棉极易吸水变潮 而污染杂菌。棉塞大小、松紧要与试管口的口径相一致，塞人试管的棉塞 要紧贴管壁，不能留有缝隙。过紧妨碍空气流通，也不便操作； 过松则达不到过滤杂菌的目的，且棉塞易掉人试管或脱离试管 口。
松紧度以提起棉塞后试管跟着被提起而不脱落，拔出棉塞可 听到轻微声音为适宜。标准棉塞应是塞头略大，不易变形，人管 部分占棉塞总长的2/3,露在管外部分则为1/3 (不少于1厘米）。 塞好棉塞即可进行装锅灭菌。为避免灭菌时冷凝水淋湿棉塞，一 般在棉塞外要包扎1层牛皮纸或2层旧报纸，也有将7〜10支试 管捆在一起，在棉塞外包扎牛皮纸，或将试管装在铁丝筐里再在 棉塞外包扎牛皮纸。
装人高压灭菌锅时，试管均要竖放，切勿倾 斜或卧置。在0。11兆帕（1。05千克/平方厘米）压力下灭菌30分钟，待温度降到60X：时，斜面培养基要趁热摆成斜面，斜面长度以不超过试管长度的2/3为宜，凝固后即成斜面；平板培养基是在无菌条件下进行无菌操作，将经灭菌的三角瓶或试管中的培养基按15〜20毫升的量倒人无菌培养皿中，平放，凝固后即成平板培养基，通常简称平板，一般是现用现倒；柱状培养基是将灭菌后的试管直立放置，凝固后即成柱状培养基。
在冷天制作斜面或平板，最好在摆好后，立即覆盖1层洁净的棉垫，以免斜面管壁和平板皿壁产生大量冷凝水珠而影响接种和培养。
2018-05-23 20:25:01
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