菌落总数有什么检测方?菌落总数有什么检测方法
2016-02-26 14:08:32Y***
菌落总数有什么检测方法菌落总数有什么检测方?菌落总数有什么检测方法:菌落总数的测定,一般是将被检样品制成几个不同的10倍递增稀释液,然后从每个稀释液中分别取出1mL置于灭菌平皿?
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基本操作菌落总数测量方法基本操作一般包括:样品的稀释--倾注平皿--培养48小时--计数报告。国内外菌落总数测定方法基本一致,从检样处理、稀释、倾注平皿到计数报告无明显不同,只是在某些具体要求方面稍有差别,如有的国家在样品稀释和倾注培养基时,对吸管内液体的流速,稀释液的振荡幅度、时间和次数以及放置时间等作了比较具体的规定。
具体操作步骤样品的处理: (1)以无菌操作取检样25g(或25ml),放于225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内预置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨制成1:10的均匀稀释液。 (2)固体检样在加入稀释液后,最好置灭菌均质器中以8000~10000r/min的速度处理1min,制成1:10的均匀稀释液。
(3)用1ml灭菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混合均匀,制成1:100的稀释液。倾注培养:(1)根据标准要求或对污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分别在制10倍递增稀释的同时,以吸取该稀释度的吸管移取1ml稀释液于灭菌平皿中,每个稀释度做两个平皿。
裸露售卖是造成菌落总数超标的原因之一(2)将约15ml凉至46℃营养琼脂培养基注入平皿,并转动平皿,混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液(不含样品)的灭菌平皿内作空白对照。 (3)待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h,取出计算平板内菌落数目,乘以稀释倍数,即得每克(每毫升)样品所含菌落总数。
计数和报告:培养到特定时间后,计数每个平板上的菌落数。可用肉眼观察,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落总数后,求出同稀释度的各平板平均菌落数,计算出原始样品中每克(或每毫升)中的菌落数,进行报告。 注意事项:(1)操作要快而准,包括材料、加样、倒培养基。
(2)吸液体时液体不能进入吸头。
(3)样品稀释时一定要混匀。
(4)倒培养基前,瓶口要过火焰。
(5)一定要有空白对照。
(6)培养基温度,培养基薄厚应控制好。
(7)检测时一定要使平皿完全暴露于空气中。 。
2016-02-26 14:08:32
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