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求沉淀的蛋白质在饱和硫酸铜溶液中再溶解的解释在我们的生化课中,有

2006-10-22 18:17:47夏***
在我们的生化课中,有一个传统实验,如下: 1、取1支试管,加入1ml卵蛋清溶液,再加入2%硫酸铜溶液1滴,观察沉淀生成。 2、再向试管中加入过量的饱和硫酸铜溶液,观察沉淀的溶解。 实验现象确实如此。 但当我们向多名老师询问实验步骤二沉淀溶解现象的原因时,没有一个老师能够很确切、肯定地告诉我们原因,最多只能给出个猜测性结论。即使询问了我校的化学老师,也没能得到确切解释 。 请想:变性的蛋白质是不会再溶于水的。以上实验中,铜离子已经使蛋白质变性了。 那么请问,实验的步骤二中的沉淀为什么会溶解? 答案最好是非常确切和肯定的,尽量不要猜测。 谢谢了,希望大家不要骂我答题条件过于苛刻。 以下是“五行山下又经”朋友的回答(在这里表示感谢), 但我觉得有所不妥,所以没有采纳,大家可以再看一看: 盐溶液(比如硫酸铜)使蛋白质沉淀的原因不是蛋白质变性而是盐析,少量的盐溶液改变了蛋白质的溶解度,所以在步骤一的时候,溶剂(水)的量相对不足,所以发生了沉淀,但是当加入足够的溶剂(硫酸铜是饱和了,但是蛋白质还能继续溶解),原来析出的蛋白质重新被溶解。这里可能有一个认识上的误区,所谓饱和硫酸铜溶液,饱和的只是硫酸铜,对于其他溶质,还是可以继续溶解的。 这个实验其实主要的目的是分别蛋白质的盐析和变性是两个不同的过程。如果加入重金属,或者加热,蛋白质沉淀以后,再加入无论多少水,都不会重新溶解。 盐析和变性的本质区别在于是否有蛋白质的二级结构改变。 盐析只是改变了蛋白质分子和水分子的结合方式 变性则发生了蛋白空间结构改变,主要是次级键和二硫键破坏,不过一般不涉及一级结构被破坏。 盐析 蛋白質分子表面多少有一些較不具?O性的?^域,水分子?谶@些非?O性?^的表面聚集,形成?似『水籠』的??造 (??下?D),以便把蛋白質溶入水中。一旦蛋白質溶液加入硫酸銨,後者吸引了大量水分子,使水籠?o法有效隔離蛋白質的非?O性?^,造成這些非?O性?^之間的吸引,因而沈?障?怼? 变性 蛋白质受到酸、碱、尿素、有机溶媒、重金属、热、紫外光及X-射现等物理或化学的破坏,引起蛋白质自然之分子结构的改变,并引起生理活性的消失,称为变性作用。 变性作用破坏了蛋白质的二级、三级、四级结构,一般不会影响其初级结构。 关于铜的重金属性的问题 1.铜在重金属中相对比较轻,相对银,汞和其他重金属来说。比它在轻的Fe就不算重金属了。 2.重金属沉淀的蛋白质常是变性的,但这里的作用是盐析,不是变性,因为正如你说的,变性了就不能再溶解。 求沉淀的蛋白质在饱和硫酸铜溶液中再溶解的解释在我们的生化课中,有一个传统实验,如下:1、取1支试管,加入1ml卵蛋清溶液,再加入2%硫酸铜溶液1滴,观察沉淀生成?

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  •   这是一种胶粒电性反号现象。也就是胶粒可移动边界层到溶液中部的电位差(ξ)电位变号现象。 一般的溶胶中加入电解质时,电解质中与胶粒电性相反的离子(简称反号离子)便要更多地分布在胶团的可动层,甚至挤入固定层。随着反号离子的增加,不但中和了胶粒表面的电荷量,并使胶团的扩散层变薄,ξ电位下降,胶粒相互聚结的机会也就增多了,而当ξ电位降到某临界值时,胶粒表面所带的电荷大部分已被反号离子中和,离子间的吸引力上升为主要矛盾,聚沉就产生了。
      这就是该实验提到的"1、取1支试管,加入1ml卵蛋清溶液,再加入2%硫酸铜溶液1滴,观察沉淀生成" 有时候,外加电解质的反号离子能被胶粒表面强烈的吸附,那有会由于胶粒固定层内迅速积累了过多的反号离子而迫使ξ电位变号,也就是原来胶粒带的电荷的电性改变(从带正电变为带负电,或者从带负电变为带正电)。
      此时胶粒ξ电位又升高(只是与以前反向了),胶粒之间的排斥力增大,使聚沉的胶粒溶解(但不是任何胶体都有此现象)。这就是你的实验中提到的"2、再向试管中加入过量的饱和硫酸铜溶液,观察沉淀的溶解"。但如果聚沉了的胶体时间过久的话,你的实验2可能就做不成功了。
       我对生物化学知识了解很少。以上回答纯从物理化学方面来回答的。 。
    2006-10-22 23:04:18
  • 好多年了,竟终于有人提出了这个问题,几乎可以这样说,在26年前,我做这个实验,就发现了这个问题,可是你并未有对实验的现象做详细的观察和记录,因此可能也就无法探测其中的奥妙了,在当时,我也试着去询问老师,因为在教科书里没有这方面的任何解释,但我可以根据实验所产生的现象,知道产生这现象的原因.而且,在以后的几年里,我也给我的学生演示过,并询问他们是什么原因,可是学生却不感兴趣,所以,这样的实验我也就不再继续研究了,在一定的时间里,我也曾经关心有关杂志是否有这样的报道,可是令人失望,你有空再仔细做一下实验,最好是事先有一个比较周密的计划,若有了什么想法,我们可以再讨论.注意,在我们随便丢弃的试管里,可能就包含有什么奥秘呢.
    2006-10-22 22:07:29
  • 是蛋白质完全溶解了还是只有一部份溶解? 如果是只有一总分溶解,那就好解释,已经变性的蛋白质把铜离子包在里面,保护了其它的蛋白质,所以其它的蛋白质还没有变性。如果是全部溶解的话,我认为可能是硫酸铜的物质的量不大,只有少量蛋白质变性,剩余的蛋白质被变性的蛋白质保护了。由于变性的蛋白质只是少量,所以它没溶解也看不出来。不知道我的解释合不合理。
    2006-10-22 20:08:38
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